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酯化梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法

發表時間:2022-06-24
酯化梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

phospho-AQP2(Ser264) 磷酸化水通道蛋白2抗體
AXL 粘附相關激酶抗體
phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703) 磷酸化粘附相關激酶抗體
phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
phospho-AKT1(Ser129) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
phospho-ATF4 (Ser245) 磷酸化活化轉錄因子4抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser213) 磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser650) 磷酸化雄激素受體抗體
phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體
phospho-AKT1(Thr34) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-ATF2(Ser472) 磷酸化活化復制因子2抗體
3-Apr 凋亡相關蛋白3抗體
ATG18 自噬相關蛋白18抗體
ATG4A 自噬相關蛋白4A抗體
APOA4 載脂蛋白A4抗體
ALOX12 12脂氧合酶抗體
Angiotensin III 血管緊張素III抗體


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