在深入探討SH.hEXl(46.xx)人胚胎干細胞系的傳代方法時，我們不得不強調無菌操作與精確控制環境條件的重要性。為了維持這些細胞的遺傳穩定性和增殖潛能，每一步操作都需細致入微。

傳代前，首先確保培養箱內的溫度穩定在37°C，并含有5%的CO?，以模擬體內環境。隨后，使用無菌技術從培養瓶中輕柔吸出舊培養基，避免對細胞層造成機械損傷。接下來，以適量的磷酸鹽緩沖液（PBS）輕輕洗滌細胞表面，去除殘留的培養基和死細胞，此步驟重復兩次以確保清潔。

隨后，加入適量的胰蛋白酶-EDTA溶液，覆蓋細胞層并置于培養箱中短暫孵育，具體時間需根據細胞貼壁強度調整，以剛好使細胞呈單細胞懸液狀態為宜。通過顯微鏡觀察，一旦細胞開始變圓并輕輕脫離培養皿底部，立即加入等體積的含血清培養基中止胰酶作用，并輕柔吹打使細胞完全分散。

之后，根據實驗需求，將細胞懸液按一定比例稀釋后接種到新的培養瓶中，補加新鮮培養基至適當體積，并輕輕晃動培養瓶使細胞均勻分布。完成這一系列操作后，將培養瓶重新放回培養箱中繼續培養，定期檢查細胞生長狀態，適時進行換液和傳代操作，以確保SH.hEXl(46.xx)人胚胎干細胞系的健康與活力。

值得注意的是，傳代過程中還需密切關注細胞的形態學變化，如出現異常增殖、分化或污染跡象，應及時采取措施處理，以維護細胞系的純度和功能特性。此外，建立詳細的操作記錄和質量控制體系也是不可或缺的，它們為科研工作的連續性和可重復性提供了重要保障。


產品僅用于科研收到細胞后，取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：

1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱，然后又將培養瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養基，吸出，分到新的培養瓶中。一傳二。



注意：傳代后一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。