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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4314
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4314 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4314 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
*芽胞桿菌（Bacillus atrophaeus）ATCC 9372；（曾用名：枯草芽胞桿菌黑色變種）規(guī)格: 10ml
炭黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
松生莖點霉拉丁屬名: Sydowia polyspora
長雙歧桿菌拉丁屬名: Bifidobacterium longum
鴨疫里氏桿菌拉丁屬名: anatipestifer
畢赤酵母用途: 高效發(fā)酵 植酸酶
耐冷冷桿菌拉丁屬名: Cryobacterium psychrotolerans
香菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膜醭假絲酵母拉丁屬名: Candida membranifaciens
咸海鮮芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus jeotgali
病毒拉丁屬名: Infectious bronchitis virus
弗雷德里克斯堡假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
紫紅曲霉拉丁屬名: Monascus purpureus
環(huán)形泰勒蟲（安西株）拉丁屬名: annulata
中間根瘤菌屬拉丁屬名: Mesorhizobium shangrilense
鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格ABCD4 英文名稱： 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4 0.2ml
Anti-CD8/RBITC 羅丹明標(biāo)記CD8IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
aFGF-1 ELISA Kit 大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-APP(phospho Thr668) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白(p-APP Thr668)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM46D/CT112 /抗原112 規(guī)格 0.2ml
IL-1(Human Interleukin 1) ELISA Kit 人白介素1 96T
MLCK 英文名稱： 肌球蛋白輕鏈激酶 0.1ml
CD94/KLRD1 英文名稱： NK細(xì)胞表面抑制性受體CD94 0.2ml
Anti-NKG2C NK細(xì)胞受體2CMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體1AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MPO 髓過氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin alpha E2 整合素alpha E2 規(guī)格 0.1ml
HBcAb(Human anti-hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 人核心 96T
Pan Cytokeratin 英文名稱： 廣譜細(xì)胞角蛋白PCK 0.1ml
CATSPER3 英文名稱： 陽離子通道相關(guān)蛋白3 0.2ml
Anti-phospho-Bcl 10(Ser218) 磷酸化Bcl-10Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
E4F1 英文名稱： E4F轉(zhuǎn)錄因子1 0.2ml
瓜氨酸環(huán)肽 Anti-CCP 0.1ml
Anti-URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記病毒X蛋白(HBxAg)C端IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1.4(Ser27) 磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白 規(guī)格 0.1ml
CD146/MCAM 細(xì)胞粘附分子CD146抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CXCR3 英文名稱： 細(xì)胞表面趨化因子受體3 0.1ml
Anti-Calpain 1 鈣蛋白酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HIV(Human anti-immunodeficiency virus antibody) ELISA Kit 人抗人類病毒Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MAD1 Mad1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ketohexokinase 肝果糖激酶 規(guī)格 0.2ml
sRANKL ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基 96T
PRDX5+PRDX6 英文名稱： 過氧化還原酶5/6 0.1ml
