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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4316
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-09
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4316
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

50T

LZR4316

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準品,并將所得標(biāo)準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準品,并將所得標(biāo)準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli

竹針孢座囊菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

*血紅鉚釘菇(又名松傘菌)拉丁屬名: Chroogomphus rutilus

油桐盾殼霉用途: 植物病原物;用于該菌種群演化與流行學(xué)監(jiān)測。

柔毛鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces flocculus

尖孢鐮刀菌用途: 代謝產(chǎn)物

秀珍菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

蠟狀芽孢桿菌用途: 固氮

蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

鏈霉素鏈霉菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

膠孢鐮孢拉丁屬名: Fusarium subglutinans

蘇云金芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

卵形巴貝斯蟲(文縣株)拉丁屬名: ovata
兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商DYRK1A 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶MNB 0.2ml

銜接蛋白β Anti-beta Adaptin/AP2 0.1ml

Anti-Gentamicin Monoclonal Antibody /Gold 膠體金離子標(biāo)記小鼠抗慶大霉素單克隆IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml(35nm-40nm)

Rhesus antibody Rh phospho-ER-beta(ser87) 磷酸化雌激素受體β 規(guī)格 0.1ml

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) 防御素β2抗原(大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

PL12/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-PL12-antibody,PL12/AlaRS ELISA Kit進口/分裝

PL7/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-PL7-antibody ELISA Kit特價供應(yīng)

CD96 英文名稱: CD96 0.2ml

Anti-HPV 人類狀瘤病毒Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Human SS-B/La Antibody ELISA Kit 人抗SS-B/LaMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Integrin alpha 1/CD49a 整合素α1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Lipin 1 磷脂酸磷酸酯酶LPIN1 規(guī)格 0.2ml

HSV-Ag2(Human Herpes simplex virus 2) ELISA Kit 人單純病毒抗原2 96T

RNF135 英文名稱: 環(huán)指蛋白135 0.2ml

品名 規(guī)格 備注

Vesicle docking protein p115 英文名稱: 囊泡對接蛋白p115 0.2ml

DAZL 英文名稱: 細胞發(fā)育相關(guān)蛋白DAZL 0.2ml

Anti-APOH 載脂蛋白HMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Phospho-ELk1 (Ser383) 英文名稱: 磷酸化細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1 0.1ml

固生蛋白 Anti-Tenascin 1ml

Anti-Tissue factor/CD142/CF3/F3/FITC 熒光素標(biāo)記組織因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

CXCR4 英文名稱: 細胞表面趨化因子受體4 0.1ml

Anti-IKK beta KB抑制蛋白激酶βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

HABP(Human Hya]uronate binding protein) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-HSP75/TRAP1 熱休克蛋白-75Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MARCH9 膜相關(guān)環(huán)指蛋白9 規(guī)格 0.2ml

KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人激肽釋放酶6 96T

RCC2 英文名稱: 染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2 0.2ml

 


聯(lián)系方式
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